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    離心機的選擇
    瀏覽次數:1358發布日期:2019-08-09

    I 離心機的相關知識介紹                                                       

    離心技術主要用于各種生物樣品的分離和制備,生物樣品懸浮液在高速旋轉下,由于巨大的離心力作用,使懸浮的微小顆粒(細胞器、生物大分子的沉淀等)以一定的速度沉降,從而與溶液得以分離,而沉降速度取決于顆粒的質量、大小和密度。

    ●     相對離心力(RCF)

     

    又稱為(g)力是在離心過程中實際施加在樣品上的作用力。

    RCF=1.18x離心半徑(mm)x(轉速/1000)2

       在離心過程中能夠直接設定離心力離心,可以使結果更加準確、可靠,更具有科學性。

    ●     轉速(rpm)

    通常以每分鐘多少轉來表示。相對離心力與轉子轉速的平方成正比。因此,轉速是決定離心力的主要因素。

    ●     離心半徑

    指轉子中軸到樣品管中心的距離,離心半徑與離心力成正比。不同的轉子具有不同的離心半徑。不同廠家相同容量的離心機轉子半徑不同,相同的轉速所得到的離心力也不同,

    對RCF會產生很大影響。

     

     

    綜上所述:轉速、離心半徑均對離心力產生較大影響,在實際使用過程中,能夠直接設定離心力,就可以把影響降到zui小。

     

     

     

    II 離心效果                                                                    

     

    ●     離心積分

    相對離心力和離心時間是決定離心效果的關鍵因素。但無法僅用這兩個參數來準確衡量離心效果。上公認使用離心積分(HRF)來衡量離心效果。

          離心積分是指離心過程中離心力對離心時間的積分。離心積分考慮了離心過程中各種影響因素對離心加速的影響,保證施加于樣品的離心力總量一致,從而保證一致的離心效果。離心積分還表明:短時間的高速離心和長時間的低速離心可以獲得相同的離心效果。

    ● 差速離心(differential centrifugation )

          差速離心法是利用樣品中各種組分的沉降系數不同而進行分離的方法,又稱差分離心或差級離心。通常兩個組分的沉降系數差在10倍以上時可以用此法分離。在差速離心中細胞器沉降的順序依次為:核、線粒體、溶酶體與過氧化物酶體、內質網與高基體、zui后為核蛋白體。沉降系數差別在一個或幾個數量級的顆粒,可以用此法分離

       差速離心首先要選擇好顆粒沉降所需的離心力和離心時間,應用方式與學科:

       1:分步改變離心速度,用不同強度的離心力使具有不同密度的物質分批分離的方法。

    應用學科:生物化學與分子生物學(一級學科);方法與技術(二級學科)

    2:利用不同物質沉降速率的差異,在不同離心速度下分離和收集不同顆粒的離心技術。常用于分離細胞勻漿中的各種細胞器。

    應用學科:細胞生物學(一級學科);細胞生物學技術(二級學科)

    差速離心法的優點是樣品的處理量較大,用于大量樣品的初分離,可使用容量較大的轉子

     

     

     

    III  安全離心                                                            

      操作者的安全防護

          樣品與轉子在高速離心狀態下會產生巨大的離心力,因此對使用者的安全保護是離心機設計的首要因素。

    ●     需用高強度材料

    【1】       環氧涂層鋼制材料:抵抗各種溶劑和碎片的侵蝕。

    【2】       鋼制結構,不銹鋼腔:高強度,抗腐蝕

    【3】       盔甲電鍍:當轉子或吊桶碎裂是,能夠起到保護腔體作用

    ●     不平衡保護,不平衡時自動停機,自動失衡識別。

    ●     轉子自動識別【高速離心機】,超速保護。防止使用者誤操作導致危險的發生

    ●     自動平衡,無需配平

    ●     保證轉子高速運轉時突然發生軸斷裂時:

    【1】       轉子不會飛出

    【2】       離心力外表看不成變形

    【3】       斷電后能正常開蓋

    【4】       內腔體變形不超過:3mm

    【5】       離心機在試驗臺上不發生水平位移

    ●     使用者需與離心機保持至少30cm的安全距離

    ●     溫度控制,保證生物樣品活性

    離心常見的溫度設定為:4℃,20,  37℃ ,其中以4℃(生物零度)zui為重要,這就要求離心機具備預制冷功能、定溫啟動功能,保證樣品一放入就處于安全溫度下離心。

    Ⅳ  舒適離心                                                                 

       低噪音設計:

     通常離心機噪音范圍為55—70dBA;

     65dBA為可接受的噪音水平

    <60dBA為較好的噪音水平

    每增加3dBA相當于增加一倍的噪音效果

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